Share/Save/Bookmark
 
پنجشنبه ۱۷ شهريور ۱۳۹۰ ساعت ۲۰:۱۴
کد مطلب : 5284
 

شوشتري پورمحمره، عبدالحميد
مقايسه ايمني زايي واكسن گامبورو روغني تهيه شده از سوريه حاد بومي با واكسن روغني گامبورو تجارتي
 
مقايسه ايمني زايي واكسن گامبورو روغني تهيه شده از سوريه حاد بومي با واكسن روغني گامبورو تجارتي
در اين طرح تحقيقاتي در مرحله اول حدت و پاتوژنيستيه جدايه IR499 ويروس گامبورو با دو روش مولكولار و در موجود زنده (In vivo) بررسي شد. ميزان مرگ و مير در جوجه هاي SPF و گوشتي به ترتيب 85% و 22% بود. آتروفي بورس 4 روز پس از تلقيح ويروس مشاهده شد. اندكس وزني بورس در 4 و 9 روز پس از تلقيح براي جوجه هاي SPF به ترتبيب 7/4 و 2/1 و براي جوجه هاي گوشتي حساس به ترتيب 7/1 و 7/0 بود. جراحات در جوجه هاي تلقيح شده شامل خونريزي كم تا گستردده در بورس طحال با نقاط سفيد رنگ كبد چرب تورم و موزاييكي شدن كليه و خونريزي در ماهيچه ها بود. ضايعات هيستوپاتولوژيك شامل نكروز شديد بورس تخليه لنفاوي بعضي از لوبهاي تيموس دژنرسانس شديد و نكروز كبد قابل مشاهده شد. با استفاده از روش RT-PCR يك قطعه 643 جفت بازي با روش nested-PCR تكثير و با استفاده از Sad , HhaI SsPI StuI مورد هضم آنزيمي قرار گرفت. هر يك از آنزيمهاي Stul, SsPI داراي يك محل عمل برش روي محصول PCR بودند در حاليكه آنزيمهاي Sad, HhaI فاقد محل عمل برش بودند. اين نتايج كاملا با الگوي هضم آنزيمي سوريه هاي بسيار حاد مطابقت داشت. مطالعات مولكولار و پاتوژنسيتي جدايه IR499 را به عنوان يك سويه بسيار حاد ويروس گامبورو (vvIBDVs)مورد تأييد قرار داد در مرحله دوم از ويروس مذكور با دو روش تكثير و تيتراسيون روي تخم مرغ SPF و نيز در بورس جوجه SPF ويروس تكثير و سپس واكسن روغني تهيه گرديد. واكسنهاي توليد شده با تلقيح به مرغهاي مادر با يكديگر و نيز با يك واكسن روغني تجارتي مقايسه گرديدند. روند تغييرات سرمي با استفاده از روش اليزا مورد بررسي قرار گرفت در اين مطالعه واكسن روغني غير فعال شده از جدايه IR499 با دو روش تكثير ويروس روي تخم مرغ و نيز بورس جوجه هاي SPF تهيه و به همراه واكسن روغني تجارتي رايج در مرغهاي مارد و در گروههاي مجزا استفاده شد. از تزريق واكسن ها در 20 هفتگي ميزان تيتر آنتي بادي در مرغهاي گروه P1 (واكسن روغني با منشاء تخم مرغ) و P2 (واكسن روغني با منشاء بورس) P3 (واكسن روغني تجارتي) رد 24 هفتگي به حداكثر خورد رسيد مقدار تيرآنتي بادي القاء شده توسط واكسن روغني با منشاء بورس گروه P2 نسبت به تير حاصله از واكسن روغني با منشاء تخم مرغ گروه P1 و تيترناشي از واكسن روغني تجارتي گروه P3 بيشتر بود. بالاتر بودن ميزان آنتي بادي القاء شده تحت تأثير واكسن روغني با منشاء بورس در گروه P2 بعد از رسيدن تيتر به حداكثر (در 24 هفتگي) در تمام دوره مطالعه ثابت بود مقادير تيترآنتي بادي در گروههاي P3 P1 در هريك از زمانهاي مورد مطالعه تفاوت معني داري با هم ندارند در مرحله سوم در سن 29 و 30 هفتگي عدد تخم مرغ نطقه دار از كل مرغهاي مادر جمع آوري شد. از جوجه هاي هر گروه هر 3 روز يكبار و از روز اول 15 قطعه براي سوم گيري و 10 قطعه براي آزمايش چالش انتخاب شدند. بدين ترتيب اين كار در 1، 4، 7، 10ة 13، 16، 19، 22، 25 و 28 روزگي انجام شد. 3 روز پس از چالش با ويروس حاد وجود و تأثير ويروس در بورس با روشهاي رسوب در ژل مورد بررس قرار گرفت. با توجه به ميزان آنتي بادي مادر در روز اول اين گروه توانست تا روز نوزدهم در مقابل چالش مقاومت نشان دهد. در گروهي كه والدين آنها واكسن روغني با منشاء تخم مرغ دريافت كرده بودند اولين حساسيت را در روز شانزدهم يعني هنگاميكه ميانگين تيتر 1333 بود مشاهده شد با توجه به اينكه اختلاف بين دو تيتر 1220 (مربوط به نتاج گروه P2 در روز نوزدهم) و 1333 (مربوط به نتاج گروه P1 در روز شانزدهم) معني دار نيست بنابراين مي توان نتيجه گرفت كه در سيستم اليزاي طراحي شده در اين مطالعه حد تيتر آنتي بادي محافظت كننده در چالش بين 1350 تا 1400 است و مقادير كمتر از اين دامنه احتمالا حساسيت به چالش را نشان مي دهد. اولين موارد حساسيت در گروه كه واليدن آنها واكسن روغني تجارتي دريافت كرده بودند در سن سيزده روزگي بعضي هنگاميكه ميانگين تيترآنتي بادي در اين گروه 1920 بود مشاهده شد. نتايج كاربرد واكسن روغني با منشاء تكثير بورس بخوبي نشان داد كه كاربرد اين واكسنها يكي از نيازهاي مبارزه با سويه هاي حاد يعني توليد مقادير بالاي آنتي بادي در مادران براي انتقال به جوجه ها را تأمين مي كند. همچنين اين مطالعه نشان داد كه استفاده از سويه هاي بسيار حاد بصورت آنتي ژنهاي غير فعال مي تواند محافظت بهتري در مقابل چالش هاي ميداني ايجاد كنند.